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021-65232515
產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類:病理學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-30
簡(jiǎn)要描述:實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:網(wǎng)狀纖維(reticular fiber)網(wǎng)狀纖維在疏松結(jié)締組織中含量較少,纖維較細(xì),有分支,彼此交織成網(wǎng)狀。用浸銀法可將纖維染成黑色,故又稱嗜銀纖維(argyrophilic fiber)。
網(wǎng)狀纖維染色銀染實(shí)驗(yàn)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:網(wǎng)狀纖維(reticular fiber)網(wǎng)狀纖維在疏松結(jié)締組織中含量較少,纖維較細(xì),有分支,彼此交織成網(wǎng)狀。用浸銀法可將纖維染成黑色,故又稱嗜銀纖維(argyrophilic fiber)。電鏡觀察,網(wǎng)狀纖維具有等間距的橫紋結(jié)構(gòu),其化學(xué)成分也是膠原蛋白,和膠原纖維相似。網(wǎng)狀纖維的嗜銀性是由于包在原纖維上的糖蛋白所致。
實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:氨銀液被組織吸咐與組織中的蛋白結(jié)合,經(jīng)甲醛還原成黑色的金屬銀沉積于組織內(nèi)及表面。用氯化金調(diào)色后,再用硫代硫酸鈉液洗去未還原的銀鹽,從而將組織內(nèi)的網(wǎng)狀纖維清晰地顯示出來(lái)。
實(shí)驗(yàn)操作流程:
1、切片脫蠟至水,蒸餾水洗,
2、用0.5%高 錳酸鉀氧化5min,
3、自來(lái)水洗,繼用蒸餾水洗,
4、用2%草酸漂白切片2min,
5、自來(lái)水洗,蒸餾水洗,
6、2%硫酸鐵鈹媒染5min,
7、水洗,蒸餾水洗,
8、滴入氨性銀溶液浸染3 -5min,
9、蒸餾水洗數(shù)次,
10、 10%甲醛液還原5-10min,
11、水洗2min,
12、用核固紅染色10-15min,
13、水洗10min, 各級(jí)酒精脫水,
14、 常規(guī)透明,中性樹(shù)膠封固。
結(jié)果:網(wǎng)狀纖維黑色,核紅色,膠原纖維黃棕色。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或80度保存,組織不少于100mg;
2、培養(yǎng)細(xì)胞:通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2x106個(gè)細(xì)胞于EP管,加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復(fù)凍融) ;
3、血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入05ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-80°C可長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融) ;
4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20天, -80°C可長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融) ;
5、石蠟切片,冰凍切片以及細(xì)胞爬片,涂片等。
6、樣本運(yùn)輸:可選擇以下任何一種方式寄送標(biāo)本
組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后,加冰袋寄送;
細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;
血清或上清液直接加冰袋寄送(視快遞時(shí)效一般控制在2-3天內(nèi)),
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、圖片;
2、完整項(xiàng)目報(bào)告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果)。
其他:
1、所使用的玻璃儀器,須用清潔液處理。
2、配制氨銀溶液時(shí),氨水加入的量不能過(guò)多或不足,過(guò)多感應(yīng)下降,會(huì)使液體過(guò)堿,滴染時(shí),切片容易脫落,過(guò)少則感應(yīng)上升,浸染效果不佳,不好掌握。
3、配制氨銀液時(shí),有可能用玻璃蒸餾水。
4、使用的化學(xué)試劑應(yīng)盡量用分析純以上。
5、切片氧化漂白應(yīng)*,不能使殘存的福爾馬林留于片上,否則將導(dǎo)致過(guò)早還原而使浸染不均勻。
6、如果有某種原因而導(dǎo)致切片脫落時(shí),應(yīng)使用涂膠的載片,以增加附貼性。
7、如有可能,氨銀溶液以新配為佳,但也可保存于4°C冰箱中達(dá)一 個(gè)月左右,這種液體易揮發(fā),用后即須蓋緊,當(dāng)沉淀物出現(xiàn)時(shí),該溶液應(yīng)拋棄。
8、應(yīng)秀氯化金調(diào)色時(shí),可將膠原纖維著染的黃棕色去除掉。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè) | CCK8檢測(cè) | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot | 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動(dòng)物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測(cè) | ROS氧化分析 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測(cè) | 掃描電鏡實(shí)驗(yàn) | microRNA測(cè)序 |
動(dòng)物實(shí)驗(yàn) | 探針合成 | ATP/ADP檢測(cè) | 石蠟/冰凍切片 |
定點(diǎn)突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測(cè) | 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定 | 藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
|
免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn) |