內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號： 48T/96T

所屬分類：小鼠ELISA

產(chǎn)品時間：2024-08-16

簡要描述：小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)的含量。

聯(lián)系我們 在線咨詢

小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）ELISA試劑盒

內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）的含量。

LISA原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）水平。用純化的小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF），再與HRP標記的內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）濃度。

試劑盒組成：

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.        標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為12 ng/ml，8 ng/ml ，4ng/ml，2 ng/ml l， 1 ng/ml）。

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：

1．  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．  各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．  底物請避光保存。

7．  嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．  所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．  本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，   

在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD     

值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。 

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

人血管生成素（Ang）ELISA試劑盒說明書

                         大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）說明書

                           人可溶性血管細胞粘附因子1（sVCAM-1）ELISA試劑盒說明書

人表皮角蛋白(EK)ELISA Kit
人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA Kit
人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA Kit
人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)ELISA Kit
人腫瘤標志物(CA724)ELISA Kit
人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISAKit
人非小細胞肺癌抗原(LTA)ELISA Kit
人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISAKit
人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA Kit
人本周蛋白(BJP) ELISA Kit
人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA Kit
人鱗狀細胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA Kit
人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA Kit
人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA Kit
人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA Kit
人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISAKit
人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA Kit
人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISAKit
人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA Kit
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA Kit
人H-ras ELISA Kit
人c-sis ELISA Kit
人c-jun ELISA Kit
人c-fos ELISAKit
人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA Kit
人Smad1 ELISA Kit
人Smad7 ELISA Kit
人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISAKit
人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA Kit
人腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA Kitv
人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA Kit
人細胞角蛋白19(CK-19)ELISA Kit
人細胞角蛋白18(CK-18)ELISAKit
人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA Kit
人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA Kit
人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生長張刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit
人成熟促進因子(MPF)ELISA Kit
人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA Kit
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISAKit